Ascorbinsäure[1]                            1.4.1998

TPTZ-Lösung (0.048M)       6 Monate, lichtempfindlich

0.750 g  2,4,6 Tripyridyl-s-Triazin       (Sigma T 1253)

0.1 N HCl ad 50 ml

Fe(lll)Cl3 –Lösung (0.02M)  3 Monate         RT

0.324 g  FeCl3 Anhydrat

0.2N HCl ad 100 ml

Acetat-Puffer           3 Monate

1000 ml  41.0% Na-Acetat Anhydrat (5M)

125 ml   28.8% Essigsäure (5M)

Methanol ad 20% (v/v)

Trichloressigsäure (0.615M)

20 g     Trichloressigsäure

Aqua a.i. ad 200 ml

Ascorbinsäure Standard-Stammlösung (100mg/dl)   max. 3 Monate            4 bis 8°C

100 mg   Ascorbinsäure

20 ml    Methaphosphorsäure 3% (w/v)

Aqua a.i. ad 100 ml

Ascorbinsäure Arbeitsstandard (2mg/dl)

2 ml     Ascorbinsäure Stammlösung

Aqua a.i. ad 100 ml

Farb-Reagenz

ca. 50 mlAcetat-Puffer

0.5 ml   TPTZ-Lösung

0.4 ml   Fe(III)Cl3 –Lösung

Acetat-Puffer ad 100 ml

Arbeitsgang

1.0 ml   TCA-Lösung

0.5 ml   Probe oder Standard

mind. 5 min inkubieren bei RT, abzentrifugieren

einfrieren oder sofort weiterverarbeiten

 

2.5 ml   Farb-Reagenz

1.0 ml   enteiweißter Überstand

1 min Inkubation (max. 10 min!!)

Messung gegen Leerwert bei 595 nm

 



[1] B.R. Day, et al., A rapid manual method for routine assay for ascorbic acid in serum and plasma. Clin Biochem, 1979. 12: 22-26.