Propidium Iodid Ploidie-Studie               30.10.2001

Propidium Iodid Stammlösung

500 µg/ml in A. dest.                      Fluka 81845

Fixierung

Pellet aus ca. 2 x 106 Zellen

Resuspendieren in 1ml PBS

Suspension langsam zu 10ml eiskaltem 70% Ethanol pipettieren, vortexen

 

Min. 30min bei RT fixieren

 

Abzentrifugieren

 

Färbung

Pellet in 1ml PBS resuspendieren

100µl    Propidium Iodid Stammlösung

100µl    1mg/ml RNase A (DNase-frei)      Sigma R6513

 

30 min   Inkubation bei 37°C

 

Messung im Durchflußcytometer

FSC/SSC  Gate auf die Zellen

FL2      linear. 2 Peaks für G0/G1 und G2/M Phase, S Phase dazwischen